waters液相色谱柱使用过程中须注意的事项

　　waters液相色谱柱是指利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异，对混合物进行先分离，而后分析鉴定的仪器。waters液相色谱柱根据固定相是液体或是固体，又分为液-液色谱(LLC）及液-固色谱(LSC）。现代waters液相色谱柱由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。与经典液相柱色谱装置比较，具有、快速、灵敏等特点。waters液相色谱柱系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相)内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附-解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。在使用waters液相色谱柱过程中，须注意以下事项：

　　1、新waters液相色谱柱在使用前，须先用甲醇或乙腈试剂以20倍柱体积低流速冲洗，作用是使固定相能充分润湿、碳链舒展*，使waters液相色谱柱的性能达到状态。具体操作是，将配制好65%的乙腈/水冲洗后，把waters液相色谱柱进口端连接在色谱仪上，出口端放空（不可连上检测器，以免污染了检测器），以0.1ml/min~0.5ml/min的低流速将色谱柱中的清稀溶液吹干，过20分钟后再接上检测器，以1.0ml/min的流速，继续冲洗2~8小时；

　　2、waters液相色谱柱检测分析样品完毕后，须冲洗色谱柱。尤其是流动相中含有酸或盐时，需将色谱柱中的酸或盐冲洗干净，通常建议用10%甲醇水冲洗20倍柱体积；

　　3、若waters液相色谱柱处于长期闲置状态时，要将色谱柱*冲洗，建议冲洗3-4小时以上，zui后保存在纯有机试剂或高比例的有机试剂溶液（如90%甲醇水）中；

　　4、由于waters液相色谱柱的固定相疏水性较强，waters液相色谱柱在使用过程中尽量不要使用高水相条件，若水相比例过高易引起固定相疏水塌陷，引起柱效迅速下降，甚至造成不可逆的负面影响；由于碳载量高，表现尤为明显，建议使用过程中水相比例不超过90%；

　　5、waters液相色谱柱压力升高、柱性能下降：通常为色谱柱被污染，对waters液相色谱柱进行再生处理可恢复部分柱效；

　　6、waters液相色谱柱压力骤升：通常由盐析出或筛板堵塞引起，若是盐析出，用10%甲醇水低流速冲 洗至压力恢复即可；若判断并非盐析出，以纯甲醇或10%甲醇水为流动相反冲色谱柱（将waters液相色谱柱反接，不接检测器），若反冲半小时仍无效果则说明反冲无效，需寻找其他原因。